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| 蔗糖合成酶（SS）活性檢測試劑盒 |
 品牌：原鑫生物
貨號：YX-152875
規(guī)格：60T/50S
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蔗糖合成酶（SS）活性檢測試劑盒 Sucrose Synthase (SS) Activity Assay Kit 
一、蔗糖合成酶（SS）活性檢測試劑盒產品描述 蔗糖不僅是重要的光合產物，也是植物體內運輸的主要物質、碳水化合物的貯存形式之一。蔗糖 合成酶（Sucrose Synthase，SS）是植物糖代謝過程的關鍵酶，負責催化蔗糖合成與分解的可逆反應， 其合成活性可催化植物體內游離果糖和葡萄糖生成蔗糖。 蔗糖合成酶催化游離果糖與葡萄糖供體 UDPG 反應生成蔗糖，蔗糖與間苯二酚反應生成有色物 質，產物在 480 nm 處具有特征吸收峰，通過吸光值變化即可表征蔗糖合成酶的活性。 
二、蔗糖合成酶（SS）活性檢測試劑盒產品使用說明
測定過程中所需要的儀器和試劑：可見分光光度計、1 mL 玻璃比色皿、研缽/勻漿器、可調式移 液器、臺式離心機、恒溫水浴/培養(yǎng)箱和蒸餾水。 1.粗酶液的制備（可根據預實驗結果適當調整樣本量及比例） 按照組織質量（g）：提取液體積（mL）為 1：（5-10）的比例（建議稱取 0.1 g 組織，加入 1 mL 提取液）處理樣品，冰浴勻漿，4℃ 8000 g 離心 10 min，取上清即為粗酶液，置于冰上待測。 2.測定步驟 ①分光光度計預熱 30 min 以上，調節(jié)波長至 480 nm，蒸餾水調零。 ②滅活粗酶液的制備：取適量粗酶液沸水浴處理 5-10 min（密封以防止水分散失），冷卻至室溫 后即為滅活粗酶液，可將待測粗酶液統(tǒng)一進行處理。 ③在離心管中依次加入下列試劑： 
充分混勻，25℃準確反應 10 min 
充分混勻，沸水浴處理 10 min（密封以防止水分散失） 冰水浴迅速冷卻至室溫 
吸光值測定（30 min 內完成測定）：取 1 mL 反應液至 1 mL 玻璃比色皿中，測定 480 nm 處吸光 值，記為 A 測定、A 對照、A 標準和 A 空白，計算?A 測定=A 測定-A 對照，?A 標準=A 標準-A 空 白。注：空白管只需測定 1-2 次，每個測定管均需設一個對照管。 標準曲線的建立：以 3.0、2.0、1.0、0.5、0.25、0.125 mg/mL 為橫坐標（x），以其對應的?A 標準 為縱坐標（y），繪制標準曲線，得到標準方程 y=kx+b，將?A 測定帶入公式中得到 x（mg/mL）。 3.蔗糖合成酶（SS）活性計算 ①按組織蛋白濃度計算 單位定義：每 mg 組織蛋白每分鐘催化產生 1 μg 蔗糖定義為一個酶活力單位。 
②按組織樣本質量計算 單位定義：每 g 組織每分鐘催化產生 1 μg 蔗糖定義為一個酶活力單位。 
注釋：V 樣：反應體系中加入粗酶液的體積，0.03 mL；V 提：粗酶液總體積，1 mL；Cpr：樣本 蛋白濃度，mg/mL；W：樣本質量，g；T：反應時間，10 min。
三、蔗糖合成酶（SS）活性檢測試劑盒注意事項 ①若測定吸光值超出標準線性吸光值范圍：高于最高值建議將粗酶液適當稀釋后再進行測定；低 于最低值建議適當增加樣本量重新制備粗酶液后再進行測定，計算時相應修改； ②顯色完成后應在 30 min 內完成測定； ③為保證結果準確且避免試劑損失，測定前請仔細閱讀說明書（以實際收到說明書內容為準）， 確認試劑儲存和準備是否充分，操作步驟是否清楚，且務必取2-3個預期差異較大的樣本進行預測定， 過程中問題請您及時與上海原鑫生物科技工作人員聯(lián)系。
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